近日,第三軍醫大學大坪醫院野戰外科研究所第四研究室/全軍交通醫學研究所/創傷燒傷與復合傷國家重點實驗室研究人員發表論文,旨在建立簡單、可靠的大鼠表皮基底層干細胞體外分離培養方法。研究指出,兩步消化聯合Ⅳ型膠原差速貼壁法獲取基底層干細胞簡易可行,培養的細胞活力好、表型可靠。該文發表在2013年第21期《重慶醫學》雜志上。
取新生大鼠背部皮膚,采用胰酶兩步消化法獲得單細胞懸液,Ⅳ型膠原差速貼壁法富集干細胞,將慢黏附細胞作為對照組細胞,均以角質形成細胞無血清培養基培養。以β1-整合素和角蛋白19(K19)雙重熒光染色鑒定細胞表型,克隆形成實驗檢測細胞體外增殖能力。
分離培養的細胞為多角形、呈鋪路石樣排列,倍增時間約為24h,細胞形態和生長規律符合基底層干細胞的特征。免疫熒光鑒定顯示細胞共表達β1-整合素和K19,基底層干細胞克隆形成能力顯著強于對照細胞。
無血清培養基UltraCULTURE Serum-free Medium
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