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| 細胞培養在科研領域里面算是成本費用比較高的其中一項，很多客戶問我們廠家為什么我們把細胞產品發貨到他們手上的時候細胞長勢以及傳代能力很好，客戶自己培養一段時間后細胞長勢不行甚至死亡?在此恒遠小編告訴您細胞培養不容馬虎大意，正確的細胞培養無菌操作如下： 1. 實驗進行前，無菌室及無菌操作臺(laminar flow) 以紫外燈照射30-60 分鐘滅菌，以70 % ethanol 擦拭無菌操作臺面，并開啟無菌操作臺風扇運轉10 分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，且即使培養基相同亦不共享培養基，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以70 % ethanol 擦拭無菌操作臺面。操作間隔應讓無菌操作臺運轉10分鐘以上后，再進行下一個細胞株的操作。 2. 無菌操作工作區域應保持清潔及寬敞，必要物品，例如試管架、吸管、吸取器或吸管盒等可以暫時放置，其它實驗用品用完即應移出，以利于氣流之流通。實驗用品以70 % ethanol 擦拭后才帶入無菌操作臺內。實驗操作應在臺面的中央無菌區域，勿在邊緣的非無菌區域操作。 3. 小心取用無菌的實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或容器瓶口，亦不要在打開的容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約45° 角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。 4. 工作人員應注意自身的安全，須穿戴實驗衣及手套后才進行實驗。對于來自人類或是病毒感染的細胞株應特別小心操作，并選擇適當等級的無菌操作臺(至少Class II)。操作過程中，應避免引起aerosol 的產生，小心毒性藥品，例如DMSO 及TPA 等，并避免尖銳針頭的傷害等。 5. 定期檢測下列項目： (1). CO2 鋼瓶的CO2 壓力 (2). CO2 培養箱的CO2 濃度、溫度、及水盤是否有污染(水盤的水用無菌水，每周更換)。 (3). 無菌操作臺內的airflow 壓力，定期更換紫外線燈管及HEPA 過濾膜，預濾網(300小時/預濾網，3000 小時/HEPA)。 6. 水槽可添加消毒劑(Zephrin 1:750)，定期更換水槽的水。 LONZA細胞培養相關-產品目錄 http://www.603041.com/a/gb2312/product/lonza/xbpy/2010/0928/3758.html |
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